Tesis

Efek Pemberian Andrografolida terhadap Senesens Sel Glioblastoma Multiforme T98G yang Resisten Intrinsik terhadap Temozolomide : Kaitan dengan Ekspresi FOXO3a = Efects of Andrographolide Treatment on Senescence of Temozolomide-Intrinsic Resistant Glioblastoma Multiforme T98G Cells : Association with FOXO3a Expression.

Glioblastoma multiforme (GBM) adalah astrositoma kelas IV yang sangat ganas dan mematikan yang menyerang jaringan otak dan sekitarnya. Terapi TMZ diketahui sebagai terapi gold standart untuk GBM. Namun terdapat permasalahan dalam terapi TMZ dikarenakan sekitar 50% pasien GBM dilaporkan resisten terhadap TMZ. Resistensi GBM dapat disebabkan oleh mekanisme perbaikan DNA dan peningkatan ekspresi MnSOD. Faktor transkripsi FOXO3a diketahui berperan dalam regulasi MnSOD dan berkontribusi terhadap resistensi TMZ. FOXO3a juga diketahui dapat mempromosikan ekspresi p21 yang berperan terhadap senesens sel GBM. Senesens pada sel GBM dapat memicu pemrograman ulang sel GBM sehingga sel GBM dapat memeroleh fenotipe agresivitas, invasif, metastasis dan resisten terhadap TMZ. Penelitian ini mengevaluasi efek andrografolida terhadap senesens dan ekspresi FOXO3a pada sel GBM T98G yang resisten terhadap TMZ. Sel diterapi dengan TMZ, andrografolida, dan kombinasi keduanya. Hasil menunjukkan bahwa andrografolida menurunkan viabilitas sel hingga 55,6% dan terapi kombinasi menurunkan viabilitas hingga 30%. Terapi andrografolida meningkatkan ekspresi p16 dan p21 namun menurunkan aktivitas SA-β-Gal, menandakan penekanan senesens pada sel T98G. Kenaikan p16 dan p21 pasca pemberian andrografolida justru menginduksi kematian sel. Analisis ekspresi FOXO3a menunjukkan bahwa terapi TMZ menurunkan ekspresi FOXO3a, sementara andrografolida meningkatkan ekspresi mRNA tetapi menurunkan ekspresi protein FOXO3a. Terapi kombinasi menghasilkan ekspresi protein FOXO3a yang paling rendah dengan dan penurunan fosforilasi Ser-253, menunjukkan aktivasi FOXO3a. Penelitian ini berhasil membuktikan bahwa andrografolida dapat meningkatkan sensitivitas sel GBM terhadap TMZ dengan menekan senesens dan ekspresi FOXO3a pada sel T98G. Namun belum dapat dipastikan bagaimana pengaruh aktivitas FOXO3a terhadap senesens sel T98G.
Kata kunci: Glioblastoma multiforme, temozolomide, andrografolida, senesens, FOXO3a.


Glioblastoma multiforme (GBM) is a highly malignant and lethal grade IV astrocytoma that invades brain tissue and its surrounding structures. Temozolomide (TMZ) is the gold-standard therapy for GBM; however, approximately 50% of GBM patients exhibit resistance to TMZ. GBM resistance is associated with DNA repair mechanisms and increased expression of manganese superoxide dismutase (MnSOD). The transcription factor FOXO3a has been implicated in the regulation of MnSOD and contributes to TMZ resistance. Additionally, FOXO3a is known to promote the expression of p21, which plays a role in GBM cell senescence. Senescence in GBM cells can induce cellular reprogramming, leading to increased aggressiveness, invasiveness, metastasis, and resistance to TMZ. This study evaluates the effects of andrographolide on senescence and FOXO3a expression in TMZ-resistant GBM T98G cells. Cells were treated with TMZ, andrographolide, and their combination. The results demonstrated that andrographolide reduced cell viability by up to 55.6%, whereas the combination therapy further reduced viability to 30%. Andrographolide treatment increased p16 and p21 expression while decreasing SA-β-Gal activity, indicating suppression of senescence in T98G cells. The upregulation of p16 and p21 following andrographolide treatment paradoxically induced cell death. FOXO3a expression analysis revealed that TMZ treatment downregulated FOXO3a expression, whereas andrographolide increased FOXO3a mRNA levels but decreased FOXO3a protein expression. The combination therapy resulted in the lowest FOXO3a protein expression and a reduction in Ser-253 phosphorylation, indicating FOXO3a activation. This study demonstrates that andrographolide enhances GBM cell sensitivity to TMZ by suppressing senescence and FOXO3a expression in T98G cells. However, the precise impact of FOXO3a activity on T98G cell senescence remains to be elucidated.
Keywords: Glioblastoma multiforme, temozolomide, andrographolide, senescence, FOXO3a.