Skripsi

Eksplorasi Keberadaan Protein Ikat Tiamin dalam Ketan Hitam (Oryza sativa L.) sebagai Kandidat Bahan Pemeriksaan Kadar Tiamin pada Cairan Tubuh = Thiamine-Binding Protein’s Presence Exploration in Black Rice (Oryza sativa L.) as Ingredient Candidate in Body Fluid Thiamine Level Examination.

Latar Belakang: Tiamin merupakan golongan vitamin B yang dibutuhkan manusia namun harus didapatkan dari sumber luar. Tiamin memiliki berbagai fungsi esensial dalam tubuh sehingga kekurangan tiamin dapat menimbulkan berbagai masalah yang serius. Pemeriksaan kadar tiamin dalam tubuh dengan metode yang ada saat ini memerlukan biaya yang mahal. Berdasarkan hal tersebut tercetuslah ide untuk menggunakan prinsip ELISA dengan memanfaatkan protein ikat tiamin dari sumber yang mudah diperoleh dan murah untuk melakukan skrining. Penelitian ini bertujuan untuk mencari tahu keberadaan protein ikat tiamin dalam ketan hitam (Oryza sativa L.). Metode: Isolasi protein ikat tiamin dari ketan hitam (Oryza sativa L.) dilakukan dengan metode salting out, dialisis, dan dialisis kesetimbangan. Salting out menggunakan konsentrasi garam ammonium sulfat 90%. Hasil: Dalam penelitian ini didapatkan konsentrasi protein total sebesar 5.190,48 µg/mL setelah tahap salting out. Keberadaan protein ikat tiamin dalam protein total dapat dibuktikan dengan dialisis kesetimbangan. Protein ikat tiamin dari ketan hitam (Oryza sativa L.) dapat mengikat tiamin dalam dialisis kesetimbangan sebesar 0,479 µg/gram tepung. Kesimpulan: Ketan hitam (Oryza sativa L.) mengandung protein ikat tiamin.
Kata Kunci: Dialisis kesetimbangan, ketan hitam, protein ikat tiamin, salting out, tiamin


Introduction: Thiamine is an essential vitamin B group for human that must be obtained from outsource. Thiamine has several essential use in human body, hence lack of thiamine may cause several serious problems. Currently available thiamine level examination method require high cost. Therefore, we propose an idea which allow us to examine thiamine level by making use of ELISA principle and thiamine-binding protein that can be easily obtained and are cheap. This research’s purpose is to explore the availability of thiamine-binding protein in black rice (Oryza sativa L.). Method: Isolation of black rice (Oryza sativa L.) thiamin-binding protein was done by salting out, dialysis, and equilibrium dialysis. 90% ammonium sulfate concentration is chosen to be used in salting out. Result: Total protein obtained after salting out was 5,190.48 µg/mL. Presence of thiamine-binding protein was proven by doing equilibrium dialysis. Black rice (Oryza sativa L.) thiamine-binding protein is able to bind 0.479 µg/gram powder. Conclusion: Black rice (Oryza sativa L.) does contain thiamine-binding protein.
Keywords: Black rice, equilibrium dialysis, salting out, thiamine, thiamine-binding protein