Tesis

Perancangan Struktur dan Ekspresi Antigen Rekombinan untuk Deteksi Antibodi Anti Virus Hepatitis C = Structure Design and Expression of Recombinant Antigen for Detection of Anti-Hepatitis C Virus Antibodies.

Hepatitis C virus (HCV) menginfeksi lebih dari 170 juta penduduk dunia dan menyebabkan penyakit hati kronis yang berkembang menjadi sirosis dan kanker hati. Diagnosis yang akurat sangat diperlukan untuk memberikan penanganan tepat secara dini, termasuk mencegah penularan virus tersebut secara lebih luas. Pada penelitian ini antigen rekombinan HCV yang disusun dari epitop yang bersifat imunodominan, lestari, mewakili subtipe HCV yang dominan di Indonesia dan global telah berhasil dibuat untuk mendeteksi antibodi anti-HCV. Gen penyandi antigen rekombinan HCV dibuat melalui DNA sintetik setelah dilakukan optimasi kodon kemudian diklona dari vektor pUC57 ke pQE80L untuk diekspresikan pada sel E. coli. Antigen rekombinan HCV berhasil diekspresikan dan dipurifikasi dengan kromatografi afinitas Ni-NTA. Antigen rekombinan HCV menunjukkan reaksi positif terhadap serum positif HCV dan negatif terhadap serum positif HIV, HBV, dan serum kontrol. Antigen rekombinan HCV yang telah dibuat memiliki potensi untuk dikembangkan lebih lanjut ke depan dan diproduksi sebagai komponen reagensia pada kit pemeriksaan HCV.
Kata kunci: HCV, Diagnosis, Antigen rekombinan, Epitop, Ekspresi, Purifikasi


Hepatitis C virus (HCV) have been infected more than 170 million people in the world and caused chronic liver disease that lead to liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Accurate diagnosis is very important to give early appropriate treatment and to prevent HCV transmission broadly. In this research HCV recombinant antigen for detection of anti-HCV antibody has created successfully based on immunodominat and conserve epitopes that represent the most prevalent of HCV subtypes in Indonesia and global. The gene of HCV recombinant antigen was produced by synthetic DNA and successfully cloned from pUC57 to pQE80L vector to be expressed in E. coli cell. HCV recombinant antigen successfully be expressed and purified by Ni-NTA affinity chromatography. HCV recombinant antigen showed positive reaction to HCV positive serum and negative to positive serum of HIV, HBV, and control. HCV recombinant antigen posses a potential to be developed and produced in the future as the reagent component of HCV diagnostic kit.
Keywords: HCV, Diagnosis, Recombinant antigen, Epitope, Expression, Purification