Tesis

Peran Vp22 Yang Difusikan Dengan Hemaglutinin Virus Influenza H5n1 Sebagai Vaksin DNA Dalam Meningkatkan Respon Imun Humoral Dan Seluler Spesifik Pada Mencit Balb/C = The Role of VP22 fused with hemaglutinin of H5N1 Influenza virus as a DNA vaccine on the increase of specific humoral and cellular immune responses in BALB/c mice.

Penelitian mengenai pengembangan vaksin DNA pengekspresi antigen fusi hemaglutinin dan VP22 terhadap respon antibodi spesifik dan sel T CD8 pada mencit BALB/c telah dilakukan. Tujuan penelitian ini adalah untuk menilai penambahan VP22 secara terfusi pada plasmid pcDNA H5copΔTM terhadap respon imun humoral dan seluler yang diinduksi oleh vaksin DNA pemgekspresi antigen hemaglutinin virus influenza A H5N1. Metodologi yang digunakan dalam penelitian ini yaitu uji eksperimental berupa kenaikan dan reaktivitas serum yang diperoleh dari kelompok mencit BALB/c yang divaksin dengan pcdnawt, pcdnaH5copΔTM, pcdna-, pcdnaH5copΔTM-VP22, pcdnaH5copfull serta respon sel T CD8 dari spleen mencit BALB/c yang mensekresikan IFN-ɤ spesifik terhadap peptida H5N1 MHC Class I. Mencit BALB/c berusia 8 minggu divaksinasi sebanyak tiga kali secara intramuskular dengan interval waktu 2 minggu untuk tiap vaksinasi. Semua kelompok mencit menunjukkan peningkatan respon antibodi spesifik dibandingkan dengan kontrol dengan nilai rasio OD serum ketiga pada kelompok mencit pcdna-H5copΔTM, pcdnaH5copΔTM-VP22, pcdnaH5copfull dan kontrol secara berurutan adalah 1.71 (p=0.006), 1.56 (p=0.010), 1,05 (p=0.016) dan 1.01. Hasil uji statistik menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan bermakna pada kelompok perlakuan pcdna-H5copΔTM dengan pcdnaH5copΔTM-VP22 terhadap protein HA (p=0.200). Sementara pada respon sel T CD8 yang diperoleh dari optimasi ELISPOT menunjukkan adanya spot forming unit (SFC) pada spleen mencit yang divaksinasi dengan pcdnaH5copΔTM-VP22 pada berbagai konsentrasi peptida H5N1 yaitu berturutturut 20 spot (100ng), 22 spot (250ng), 22 spot (500ng), 49 spot (750ng), dan 72 spot (1000ng). Nilai spot tertinggi didapatkan dengan konsentrasi peptida H5N1 sebanyak 1000ng. Hasil yang diperoleh mengindikasikan bahwa dengan adanya penambahan VP22 secara terfusi pada pcdna-H5copΔTM dapat meningkatkan respon seluler terhadap virus influenza A H5N1.
Kata kunci: vaksin DNA, hemaglutinin, VP22, respon antibodi spesifik, respon sel T CD8


Research on the development of DNA vaccines expressing a fused gene of haemagglutinin (HA) and VP22 towards specific antibody and CD8 T-cells responses in mice BALB/c has been done. The purpose of this study was to asses the fused VP22 into the pcDNA-H5copΔTM towards humoral and cellular imune responses. The methodology used in this study was experimental method that focused on increase of antibody level of serum obtained from groups of BALB / c mice that previously vaccinated with pcDNAwt, pcDNA-H5COP ΔTM, pcDNA-, pcDNA H5COP ΔTM-VP22, pcDNA H5COP full. Response CD8 + T cell generated from spleen of mice BALB/c that secreted IFN-ɤ H5N1 peptides specific to MHC class I was also observed. Significant increase of level of specific antibody response were shown by value of control compared to third serum with mean value of OD (optical density) of pcDNA-H5COP ΔTM, pcDNA H5COP ΔTM-VP22, pcDNA H5COP full and control 1.71 (p = 0.006), 1.56 (p = 0.010), 1,05 (p = 0.015) and 1,01 respectively. Statistical analysis showed that there was no significant difference in group treated with pcDNA-H5COP ΔTM with pcDNA H5COP ΔTM-VP22 towards HA protein (p = 0.200). The ELISPOT optimizations showed response to CD8 T-cells by formation of spot forming units (SFC) in the spleen of mice vaccinated with pcDNA H5COP ΔTM-VP22 with various concentrations of peptide H5N1 applied, 20 spots (100ng), 22 spots (250ng), 22 spots (500ng), 49 spots (750ng), and 72 spots (1000ng) respectively. The highest value obtained by peptide of H5N1 with a total peptide 1000ng. The results indicated that the fused of VP22 into the pcDNA-H5copΔTM can enhance cellular responses against H5N1 influenza A virus.
Keywords: DNA vaccine, hemaglutinin, VP22, specific antibody response, CD 8 T-cells response