Tesis

Analisis Spektrum UV-Vis Sitoglobin yang Dimurnikan dari Hati Sapi = UV-Vis Spectral Analysis of Cytoglobin Purified from Bovine Liver

Sitoglobin (Cygb) adalah suatu hemoprotein yang baru ditemukan dari keluarga globin setelah hemoglobin, mioglobin dan neuroglobin. Kadarnya sangat rendah di dalam sel-sel hewan vertebrata. Terkait dengan fungsinya di dalam sel yang masih diperdebatkan, sangatlah pent ing untuk mendapatkan protein ini dalam kondisi murni agar dapat dipelajari lebih lanjut. Pada tulisan ini diuraikan proses isolasi dan purifikasi sitoglobin dari hati sapi serta Analisis spektrumnya pada rentang panjang gelombang 400-600 nm (spektrum UV-Vis). Spektrum absorpsi memperlihatkan bahwa puncak Soret Cygb pada kondisi deoksiCygb, oksiCygb, karboksiCygb, metCygb dan sianmetCygb berturut-turut adalah 426 nm, 420 nm, 420 nm, 416 nm and 422 nm. Pengukuran kinetik reduksi CygbFe menjadi CygbFe 2+ menunjukkan bahwa CygbFe 3+ dapat dikembalikan ke bentuk Cygb fungsional (CygbFe 2+ ) oleh asam askorbat dan substansi pereduksi yang terdapat di dalam sel. Reduksi ikatan sulfida pada dimer Cygb berpengaruh negatif pada pengikatan ligan oksigen.
Kata kunci: Sitoglobin, Hati sapi, Pemurnian, Analisis spektrum UV-Vis



Cytoglobin (Cygb) is a recent ly discovered hemeprotein belonging to the globin superfamily together with hemoglobin, myoglobin and neuroglobin. It is present in vertebrate cells at very low concentration. As the function of this protein is still a matter of debate, it is very important to be able to produce and purify the protein. Here in, we described the isolation of cytoglobin and its purification from bovine liver. This protein is then used in spectral analysis in the range of wavelength 400-600 nm (UV-Vis spectra). Spectral absorption shows that the Soret peaks of Cygb at several condit ions, deoxyCygb, oxyCygb, carboxyCygb, methCygb and cyanmethCygb are 426 nm, 420 nm, 420 nm, 416 nm and 422 nm respectively. The kinetic measurement of regeneration functional cytoglobin (from CygbFe 3+ to CygbFe 2+ ) shows that CygbFe 3+ (methCygb) can be regenerated to CygbFe 2+ using ascorbate and cellular reductants. The reduction o f disulfide bond in dimer cytoglobin is negatively affected for oxygen ligand binding.
Keywords: Cytoglobin, Bovine liver, Purification, UV-Vis spectral analysis