Tesis

Pengembangan Vaksin DNA Influenza A H5N1: Respon Antibodi Spesifik Hemaglutinin Mencit BALB/c terhadap Vaksin DNA Pengekspresi Antigen Fusi Hemaglutinin-CD40L

Vaksin DNA merupakan salah satu jenis vaksin dengan teknologi baru yang
cocok dikembangkan untuk menghadapi ancaman pandemi influenza A. Salah satu
kelemahan vaksin DNA adalah imunogenisitasnya yang rendah sehingga memerlukan
ajuvan misalnya ajuvan genetik seperti CD40L. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui efek pemfusian CD40L sebagai ajuvan genetik pada vaksin DNA
pengekspresi antigen hemaglutinin (HA) H5N1 terhadap kenaikan respon antibodi
spesifik HA. Komponen vaksin DNA diperoleh dengan menyisipkan fragmen DNA
penyandi protein HA dengan CD40L ke dalam vektor ekspresi mamalia pcDNA3.1.
ELISA digunakan untuk membandingkan respon antibodi spesifik HA dari empat
kelompok perlakuan hewan coba berupa mencit BALB/c betina berumur 8 minggu
yang divaksinasi dengan vektor vaksin DNA pcDNA3.1., vaksin DNA pengekspresi
HA terlarut (pcDNA3.1.HA

TM), dan vaksin DNA pengekspresi HA terlarut yang
difusikan dengan CD40L (pcDNA3.1.HA
TM-CD40L) serta PBS. Vaksinasi
dilakukan empat kali dengan selang interval tiga minggu. Hasil analisis statistik dari
nilai produksi bersih (net production) respon antibodi spesifik HA yang didapat dari
membandingkan hasil selisih dari serum terakhir dengan serum pravaksinasi
menunjukkan bahwa terdapat perbedaan bermakna antara kelompok yang divaksin
dengan DNA pengekspresi HA yang difusikan dengan CD40L dibandingkan dengan
kelompok yang divaksin vektor plasmid DNA pcDNA3.1.wt (p = 0,029) maupun
PBS (p=0,038). Hasil ini menunjukkan bahwa pemfusian antigen HA terlarut dengan
CD40L dapat meningkatkan respon antibodi spesifik terhadap HA.


DNA vaccine is a new vaccine technology which will suitable to develop to
overcome influenza A pandemic threat. DNA vaccine is able to stimulate CTL but
lack of ability to stimulate humoral response. Because it’s low immunogenicity traits,
DNA vaccine may need genetic adjuvant such as CD40L which is
immunostimulatory molecule to stimulate specific antibody response. Purpose of this
research is to know the effect of CD40L fusion with DNA hemagglutinin (HA)
H5N1. DNA fragments of HA

TM-CD40L (express soluble HA antigen fused with
CD40L) and HA
TM (express soluble HA antigen only) were inserted to pcDNA3.1.
plasmid and propagated on TOP10 E.coli. After purified, plasmids were vaccinated to
4 treatment groups (including PBS and pcDNA3.1. as controls) of 8 weeks female
BALB/c mice 4 times with 3 weeks interval. ELISA was performed to compare
antibody response from the treatments. There was significant different on HA
specific antibody response net production from pcDNA3.1.HA

TM-CD40L group
compared to pcDNA3.1.wt (p=0,029) and to PBS (p=0,038). It showed that HA
antigen fused with CD40L in a soluble form can increase antibody specific response
against HA.