Skripsi

The antiviral effect of ribavirin to the replication of dengue virus in vitro

Demam berdarah dengue (DBD) adalah penyakit paling umum di negara-negara tropis dan sub-tropis dan ditransmisikan melalui gigitan nyamuk. Namun hingga saat ini, belum ada pengobatan yang spesifik ataupun vaksin untuk DBD. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh Ribavirin pada replikasi virus dengue (DENV). Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental in vitro yang dilaksanakan di Laboratorium Departemen Mikrobiologi. Kami menggunakan sel Vero dan DENV serotipe 1 koleksi Departemen Mikrobiologi. DENV kemudian dipaparkan dengan berbagai konsentrasi Ribavirin dengan 6 kali pengulangan. Sebagai pembanding, kami menggunakan DENV yang dipaparkan dengan pelarut yaitu dimetil sulfoksida (DMSO), sedangkan DENV yang tidak dipaparkan dengan Ribavirin atau pelarut digunakan sebagai kontrol negatif. Uji fokus digunakan untuk menentukan persentase inhibisi dari replikasi DENV. Untuk menentukan efek sitotoksik dari Ribavirin, kami menggunakan MTS assay (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium). Ribavirin dengan konsentrasi 5 µg/mL menghambat replikasi virus sebesar 75% jika dibandingkan dengan DMSO. Pada konsentrasi 1 µg/mL, 0,5 µg/mL, dan 0,1 µg/mL, Ribavirin menghambat replikasi virus masing-masing sebesar 64%, 46%, dan 50% dan secara statistik menunjukkan perbedaan bermakna. Dari data yang didapat dalam penelitian ini, half inhibitory concentration (IC₅₀) adalah 0,25 µg/mL. Hasil uji MTS menunjukkan bahwa half cytotoxic concentration (CC₅₀) adalah 106,83 µg/mL sehingga Ribavirin termasuk dalam kategori tidak toksik. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa Ribavirin memiliki inhibisi yang kuat terhadap replikasi DENV dan memiliki sitotoksisitas rendah terhadap sel-sel sehat.

Kata kunci: Antiviral, virus dengue, ribavirin, sel Vero, konsentrasi inhibisi, sitotoksisitas, replikasi virus


Dengue hemorrhagic fever (DHF) is the most common disease in tropical and sub-tropical countries and is transmitted by mosquito bite. Hitherto, there is still no specific treatment or vaccine for DHF. This study aimed to evaluate the effect of ribavirin on the replication of dengue virus (DENV). This study was an in vitro experimental study that was conducted in the Microbiology Department Laboratory. We used Vero cells and DENV serotype 1 from the collection of the Microbiology Department. DENV was exposed to different concentrations of ribavirin with six repetitions. As a comparison, we used DENV that was exposed to the diluent, which is dimethyl sulfoxide (DMSO), while DENV that was not exposed to any ribavirin or diluent was used as a negative control. Focus assay was used to determine the percentage of inhibition of DENV replication. To determine the cytotoxicity effect of ribavirin, we used MTS assay (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium). Ribavirin with the concentration of 5 µg/mL inhibited virus replication by 75% compared to DMSO. At concentrations of 1 µg/mL, 0.5 µg/mL, and 0.1 µg/mL, ribavirin inhibited virus replication by 64%, 46%, and 50%, respectively, and statistically showed significant difference. From the data obtained in this study, the half inhibitory concentration (IC₅₀) was 0.25 µg/mL. The result from MTS assay showed that half cytotoxic concentration (CC₅₀) was 106.83 µg/mL; therefore, ribavirin was categorized as non-toxic. In conclusion, ribavirin has strong inhibition towards the replication of DENV and has low cytotoxicity to healthy cells.

Keywords: Antiviral, CC₅₀, dengue virus, IC₅₀, ribavirin, Vero cells, virus replication